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大鼠elisa試劑盒采集及保存方法
更新時(shí)間:2023-05-21   點(diǎn)擊次數(shù):1196次

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過洗滌后大鼠elisa試劑盒用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。


大鼠elisa試劑盒標(biāo)本的采集及保存:

1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。


2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本大鼠elisa試劑盒采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。


3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。


4.樣本處理:血清或血漿標(biāo)本推薦稀釋10,000倍。


注:以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過1個(gè)月,-80℃不應(yīng)超過2個(gè)月;標(biāo)本溶血會影響檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。


ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):

1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。


2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。


3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。


4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。


5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。


6、洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分大鼠elisa試劑盒拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。


7、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。


8、加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。


9、按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作


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上海通蔚生物科技有限公司

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